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酶活性测定方法

1、酶活性测定可以使用定时法、连续监测法和平衡法。定时法:通过测定酶反应开始后某一时间段内(t1到t2)产物或底物浓度的总变化量来求取酶反应初速度的方法。其中t1往往取反应开始的时间。

2、常用的测定方法有取样法和连续法。取样法 在酶反应开始后不同的时间,从反应系统中取出一定量的反应液,并用适当方法停止其反应,再根据产物和底物在化学性质上的差别进行分析,求得单位时间内酶促反应的变化量。

3、在上半个世纪建立了一些适用于常规工作的测酶活性浓度的方法,如测定淀粉酶的Somogyi法,碱性磷酸酶的Bodansky法、King法等等。

4、测定方法很多,常见的有化学法、免疫法和等电点聚焦法。其中化学法应用最普遍,化学法的原理主要是利用有些化合物在自氧化过程中会产生有色中间物和O2 -,利用SOD分解而间接推算酶活力。

糖化酶活力实验注意事项

1、实验条件:实验条件对测定结果的准确性也有很大的影响。在测定固体糖化酶活力时,应注意控制温度、PH值、反应时间等实验条件,以确保实验条件的一致性和稳定性。

2、用碘量法测定糖化型淀粉酶活力,操作稍有不慎,误差就会很大,结合酶作用理论,体会到提高糖化型淀粉酶活力测定的准确性,必须注意酶反应时间的选择和酶的控制。

3、根据实验要求确定。有些糖化酶测定实验,可能需要在一定的浓度范围内进行测定,这时可以根据实验要求和设备的检测范围来确定样品的稀释倍数。根据样品预计浓度确定。

4、注意事项:本品使用时最适PH0-5,淀粉糖和味精生产时应先调PH,后加酶糖化。用酶量随原料、工艺不同而变化,要缩短糖化时间需增加用量。淀粉质原料必须与酶充分接触,接触面积大,时间长,效果好。

5、本实验采用加热的方法钝化β-淀粉酶,测出α-淀粉酶的活力。在非钝化条件下测定淀粉酶总活力(α-淀粉酶活力+β-淀粉酶活力),再减去α-淀粉酶的活力,就可求出β-淀粉酶的活力。

葡聚糖酶活性的测定

黏度法 这种方法是根据酶能够降低一定浓度的标准底物(控制pH值、温度等条件)的黏度的能力来确定酶的活性。

葡聚糖酶的活性,可以用复原糖测定法指标表示。复原糖测定法(分光光度法)、粘度测定法和底物染色法。此中复原糖测定法简易适用,比较正确,并且结果重复性好,是宽泛使用的一种酶活测定方法。

β-葡聚糖含量的测定方法,大致可归纳为如下几类:(1)粘度法:其原理是大麦抽提液的粘度主要由β-葡聚糖产生(Burnett,1966;White等,1983)。

葡聚糖酶的活性用时间作为指标。根据查询相关公开信息显示,酶的活性表示为单位时间产生一定浓度的产物所需要的酶量ml。

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